TY - THES T1 - Analyse der Expression und Regulation von Chemokinen in polymorphkernigen neutrophilen Granulozyten bei der rheumatoiden Arthritis A1 - Auer,Judith Y1 - 2010/10/18 N2 - Polymorphkernige neutrophile Granulozyten (PMN) stellen den Hauptzelltyp in der entzündlichen Synovialflüssigkeit (SF) von Patienten mit rheumatoider Arthritis (RA) dar und sind, wie in Mausmodellen nachgewiesen, an der Induktion und Aufrechterhaltung der Gelenkentzündung beteiligt. Dabei ist unklar, welche Effektormechanismen der PMN zur Gelenkentzündung beitragen. Eine Hypothese ist, dass die SF PMN von RA Patienten im entzündeten Gelenk inflammatorische Chemokine synthetisieren und dadurch die Rekrutierung weiterer Entzündungszellen bewirken. Das Ziel dieser Arbeit war, die Chemokin Expression und Regulation in den SF PMN von RA Patienten mittels Mikroarray Analyse, qualitativer und quantitativer reverser Transkription-Polymerasekettenreaktion (RT-PCR) und Enzym-gekoppelten Antikörper Bindungs-Assays (ELISA) zu bestimmen. Die durchgeführten Expressionsanalysen identifizierten für die SF PMN von RA Patienten ein charakteristisches Expressionsprofil mit den hochregulierten mRNAs der Chemokine CCL3, CCL18, CXCL8 und CXCL10 und der Chemokinrezeptoren CXCR4 und CCRL2. Darüber hinaus lag die Mehrzahl der inflammatorischen Gene (86%) in den SF PMN der RA Patienten im Vergleich zu Blut PMN gesunder Spender herunterreguliert vor. Für das in dieser Arbeit erstmalig in PMN nachgewiesene Chemokin CCL18 zeigte sich eine auf mRNA- und Proteinebene unabhängige Regulation. Die Stimulation von Blut PMN mit Tumor Nekrose Faktor (TNF) alpha führte zur CCL18 mRNA Induktion, ohne dass CCL18 Protein nachweisbar war. Die Proteinsynthese von CCL18 in PMN fand durch zwei Mechanismen statt. Zum einen wurde CCL18 Protein durch Stimulation mit Interleukin (IL)-10 und Vitamin D3, unabhängig von exogenem TNF alpha, zum anderen durch den direkten Zell-Zellkontakt mit Endothelzellen (EC), abhängig von endogenem TNF alpha, induziert. Durch die insgesamt verringerte transkriptionelle Aktivität und die selektive Hochregulation von Chemokinen zeichnet sich ab, dass eine krankheitsfördernde Aktivität der SF PMN von RA Patienten darin besteht, inflammatorische Chemokine zu synthetisieren. Die Induktion von CCL18 findet vermutlich sowohl während der Extravasation in das entzündete Gewebe im Kontakt mit EC, als auch in der SF, durch Stimulation mit IL-10, statt. Diese Befunde schaffen neue Erkenntnisse über die Rolle der PMN in der Pathogenese der RA und können als Grundlage für die Entwicklung neuer Behandlungskonzepte dienen. KW - Chemokine KW - Rheumatoide Arthritis KW - Microarray KW - Tumor-Nekrose-Faktor CY - Erlangen PB - Universitätsbibliothek der Universität Erlangen-Nürnberg AD - Universitätsstraße. 4, 91054 Erlangen L2 - http://www.opus.ub.uni-erlangen.de/opus/volltexte/2010/2054 ER -